بهینه سازی شرایط عملیاتی افزایش بیان پروتئین آنتی ژن سطحی هپاتیت b در فرآیند فرمانتاسیون fed batch با تغییر شرایط محیط کشت pichia pastoris

پایان نامه
چکیده

هپاتیت b که بوسیله ویروس هپاتیت b ایجاد می شود هنوز هم از زمره معضلات عمده بهداشتی در سراسر جهان به شمار می رود. در ژنوم مخمر pichia pastoris دو کپی از ژن الکل اکسیداز (aox) وجود دارد که aox1و aox2 می باشند پروموتر aox1 در سیستم های بیان pichia جهت تولید پروتیینهای نوترکیب (با استفاده از متانول بعنوان inducer ) استفاده می شود.و ما نیز به منظور بهینه سازی شرایط عملیاتی افزایش بیان پروتئین آنتی ژن سطحی هپاتیت b در فرآیند فرمانتاسیون fed batchبا تغییر شرایط محیط کشت pichia pastoris ، محیط کشت با ترکیب تعریف شده را به داخل فرمانتور وارد شده و استریلیزاسیون در محل برای محیط کشت انجام گردید. ازسوش pichia pastoris که قبلا در ارلن کشت داده شده بود و جمعیت سلولی حدود 7/1 گرم بر لیتر رسیده بود به فرمانتورحاوی محیط کشت طراحی شده وارد شد. که نهایتا با تزریق به موقع متانول خالص به مقدار کافی در فواصل زمانی مشخص جهت تامین کربن لازم و کافی بعنوان خوراک و همچنین تزریق مرتب ویتامین های a وb هر کدام به مقدار 5/12سی سی و تریس المنت به مقدار 5/4سی سی در این فرمانتاسیون که حدودا 109ساعت به طول انجامید و مقدار بیومس تولیدی به میزان مطلوب، تقریبا 480 گرم بر لیتر و میزان hbsag به 185/0 میلی گرم بر لیتر رسید.

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

بهینه سازی شرایط عملیاتی جداسازی پروتئین آنتی ژن هپاتیت ب به روش جذب سطحی با استفاده از جاذب های معدنی

هدف در این پروژه بهبود راندمان جداسازی آنتی ژن سطحی هپاتیت ب از مخلوط پروتئینی به روش جذب سطحی می باشد که از نرم افزار طراحی آزمایشات ( تاگوچی ) استفاده می شود. در اینجا از چهار نوع جاذب معدنی مختلف با نام های تجاری a,b,c)) celite و aerosil استفاده می شود و به مقایسه راندمان جذب آنتی ژن بر روی این چهار جاذب پرداخته شده است. در فرایند جذب ، با تغییر و تنظیم شرایط محیطی، آنتی ژن سطحی هپاتیت ب بر ...

15 صفحه اول

Batch and fed-batch growth of Pichia pastoris under increased air pressure.

Pichia pastoris CBS 2612 behavior under air pressures of 1, 3 and 5 bar in culture media of glycerol (pure and crude) and methanol was studied. Generally, the increase in oxygen transfer rate due to the increase of total pressure improved cellular growth for all carbon sources and for batch and fed-batch processes with different feeding rate strategies. In batch cultures, 1.4-, 1.2-, and 1.5-fo...

متن کامل

Maximization of production of secreted recombinant proteins in Pichia pastoris fed-batch fermentation.

Pontryagin's Maximum Principle has been applied for optimization of secreted proteins from Pichia pastoris fed-batch fermentation. The objective of this work is to maximize the total accumulated product per unit operation time under different given conditions and system constraints. To obtain optimal solutions, an automated curve-fitting software, Table Curve 2D, was employed to construct the n...

متن کامل

HSF-1, HIF-1and HSP90 expression on recombinant Pichia pastoris under fed-batch fermentation

Pichia pastoris is a methylotrophic yeast used as an efficient expression system for heterologous protein production as compared to other expression systems. Considering that every cell must respond to environmental changes to survive and differentiate, determination of endogenous protein related to heat stress responses and hypoxia, it would necessary to establish the temperature and methanol ...

متن کامل

A fast approach to determine a fed batch feeding profile for recombinant Pichia pastoris strains

BACKGROUND The microorganism Pichia pastoris is a commonly used microbial host for the expression of recombinant proteins in biotechnology and biopharmaceutical industry. To speed up process development, a fast methodology to determine strain characteristic parameters, which are needed to subsequently set up fed batch feeding profiles, is required. RESULTS Here, we show the general applicabil...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه اراک - دانشکده فنی

کلمات کلیدی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023